電泳儀的研發背景與使用技巧
發布時間:2018-06-01 閱讀:1173次
電泳儀的應用雖廣泛,但是有不少用戶對其了解甚少,以下內容主要從電泳儀的研發背景與使用技巧開始介紹,助大家對其有個深入的了解!
一、電泳儀的研發背景
1937年,瑞典生化學家Tiselius集前人百余年探索電泳現象之大成,了Tiselius電泳儀,在此基礎上建立了研究蛋白質的自由界面電泳方法,利用該法次證明人血清是由白蛋白(A)、α、β、γ球蛋白組成,并因此于1948年獲得阿果獎。隨后電泳技術的發展突飛猛進,1949年,RicketlsMarrack等人證明人血清蛋白質經電泳分離可依次分為白蛋白,α1、α2、β、γ球蛋白五個組分,1957年Reiner對人血清五個組分蛋白進行了定量分析。
但自由界面電泳沒有固定支持介質,擴散和對流作用較強,影響分離效果,于是在50年代相繼出現了固相支持介質電泳。初的支持介質是濾紙和醋酸纖維素膜,目前這些介質在實驗室已經應用較少。在很長一段時間里,小分子物質如氨基酸、多肽、糖等通常用濾紙、纖維素或硅膠薄層平板作為介質進行電泳分離、分析,但目前一般使用靈敏度高的技術如液相色譜法(HPLC)等來進行分析。而對于復雜的生物大分子,以濾紙、硅膠或醋酸纖維素膜等作為支持介質進行電泳,其分離效果并不理想。于是1959年,Raymond和Weintraub,Davis和Ornstein先后利用人工合成凝膠作支持介質建立了聚丙烯酰胺凝膠電泳,從而大大提高了電泳的分辨率和分離效果,增強了電泳技術的發展、滲透及與其他技術結合配套的能力。致使各式各樣的電泳技術和電泳材料如雨后春筍、競相爭榮,成為當代實驗科學技術中品種繁多、應用廣泛、基礎與技術皆備的大技術。
一、電泳儀的使用技巧
1、電泳儀通電進入工作狀態后,禁止人體接觸電、電泳儀電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳儀電泳槽內取放東西,如需要應先斷電,以免觸電。同時要求電泳儀必須有良好接地端,以防漏電。
2、電泳儀通電后,不要臨時增加或撥除輸出導線插頭,以防短路現象發生,雖然電泳儀內部附設有保險絲,但短路現象仍有可能導致電泳儀損壞。
3、由于電泳儀不同介質支持物的電阻值不同,電泳儀電泳時所通過的電流量也不同,其電泳儀泳動速度及泳至終點所需時間也不同,故電泳儀不同介質支持物的電泳不要同時在同一電泳儀上進行。
4、在總電流不超過電泳儀額定電流時(大電流范圍),可以多槽關聯使用,但要注意不能超載,否則容易影響電泳儀壽命。
5、參照實驗要求選擇相應規格型號的電泳儀,才能確保經濟、耐用、簡單、合理。因為高、低壓電泳儀內部結構特征不同,由于高壓電泳儀常附加有多項功能,而且高壓電泳儀不能空載運行(容易造成人身傷害、內部器件損壞),導致操作上難易程度的不同等。因此正確的選購方法是:“根據實驗要求的高電壓,確定購買電泳儀的規格及型號”。
6、某些特殊情況下需檢查電泳儀電泳輸入情況時,允許在穩壓狀態下空載開機,但在穩流狀態下必須先接好負載再開機,否則電壓表指針將大幅度跳動,容易造成不必要的人為電泳儀損壞。
7、使用過程中發現電泳儀異常現象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電泳儀電源,進行檢修,以免發生意外事故。
8、電泳儀是儀器,在操作過程中要嚴格遵守操作規程,但不可避免會出現各種各樣的故障,當儀器提示有故障時,應立即處理。
9、如果電泳儀的輸出電壓U達不到預置值,應先觀察I或P是否已經恒定,或者已經達到電泳儀所規定的大I或P(JY電泳儀均有明確指示燈標志)。如果尚未達到限值,將已經恒定I或P的設置調大(有必要的話至限值),才能夠提高電壓輸出。
一、電泳儀的研發背景
1937年,瑞典生化學家Tiselius集前人百余年探索電泳現象之大成,了Tiselius電泳儀,在此基礎上建立了研究蛋白質的自由界面電泳方法,利用該法次證明人血清是由白蛋白(A)、α、β、γ球蛋白組成,并因此于1948年獲得阿果獎。隨后電泳技術的發展突飛猛進,1949年,RicketlsMarrack等人證明人血清蛋白質經電泳分離可依次分為白蛋白,α1、α2、β、γ球蛋白五個組分,1957年Reiner對人血清五個組分蛋白進行了定量分析。
但自由界面電泳沒有固定支持介質,擴散和對流作用較強,影響分離效果,于是在50年代相繼出現了固相支持介質電泳。初的支持介質是濾紙和醋酸纖維素膜,目前這些介質在實驗室已經應用較少。在很長一段時間里,小分子物質如氨基酸、多肽、糖等通常用濾紙、纖維素或硅膠薄層平板作為介質進行電泳分離、分析,但目前一般使用靈敏度高的技術如液相色譜法(HPLC)等來進行分析。而對于復雜的生物大分子,以濾紙、硅膠或醋酸纖維素膜等作為支持介質進行電泳,其分離效果并不理想。于是1959年,Raymond和Weintraub,Davis和Ornstein先后利用人工合成凝膠作支持介質建立了聚丙烯酰胺凝膠電泳,從而大大提高了電泳的分辨率和分離效果,增強了電泳技術的發展、滲透及與其他技術結合配套的能力。致使各式各樣的電泳技術和電泳材料如雨后春筍、競相爭榮,成為當代實驗科學技術中品種繁多、應用廣泛、基礎與技術皆備的大技術。
一、電泳儀的使用技巧
1、電泳儀通電進入工作狀態后,禁止人體接觸電、電泳儀電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳儀電泳槽內取放東西,如需要應先斷電,以免觸電。同時要求電泳儀必須有良好接地端,以防漏電。
2、電泳儀通電后,不要臨時增加或撥除輸出導線插頭,以防短路現象發生,雖然電泳儀內部附設有保險絲,但短路現象仍有可能導致電泳儀損壞。
3、由于電泳儀不同介質支持物的電阻值不同,電泳儀電泳時所通過的電流量也不同,其電泳儀泳動速度及泳至終點所需時間也不同,故電泳儀不同介質支持物的電泳不要同時在同一電泳儀上進行。
4、在總電流不超過電泳儀額定電流時(大電流范圍),可以多槽關聯使用,但要注意不能超載,否則容易影響電泳儀壽命。
5、參照實驗要求選擇相應規格型號的電泳儀,才能確保經濟、耐用、簡單、合理。因為高、低壓電泳儀內部結構特征不同,由于高壓電泳儀常附加有多項功能,而且高壓電泳儀不能空載運行(容易造成人身傷害、內部器件損壞),導致操作上難易程度的不同等。因此正確的選購方法是:“根據實驗要求的高電壓,確定購買電泳儀的規格及型號”。
6、某些特殊情況下需檢查電泳儀電泳輸入情況時,允許在穩壓狀態下空載開機,但在穩流狀態下必須先接好負載再開機,否則電壓表指針將大幅度跳動,容易造成不必要的人為電泳儀損壞。
7、使用過程中發現電泳儀異常現象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電泳儀電源,進行檢修,以免發生意外事故。
8、電泳儀是儀器,在操作過程中要嚴格遵守操作規程,但不可避免會出現各種各樣的故障,當儀器提示有故障時,應立即處理。
9、如果電泳儀的輸出電壓U達不到預置值,應先觀察I或P是否已經恒定,或者已經達到電泳儀所規定的大I或P(JY電泳儀均有明確指示燈標志)。如果尚未達到限值,將已經恒定I或P的設置調大(有必要的話至限值),才能夠提高電壓輸出。