非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀檢測結果的判定
發布時間:2019-04-23 閱讀:23516次
非洲豬瘟(ASF)病由非洲豬瘟病毒(ASFV)引起。 ASFV感染家豬、疣豬和南非野豬。該病通過健康和患病動物之間的直接接觸,或通過受感染的飼料間接接觸,以及通過生物載體(軟蜱)進行傳播。ASF的發病有特急性、急性、亞急性和慢性的形式。由于豬感染的病毒的毒力不同,死亡率從0%到100%不等。
非洲豬瘟檢測屬于重大疫病檢測,要求儀器具有優異的性能,無論是強陽性樣品還是弱陽性樣品,都需要的篩查到。應對非洲豬瘟疫情,熒光定量PCR檢測必不可少。
非洲豬瘟檢測熒光定量pcr儀檢測結果的判定:
1、結果分析條件設定
實時熒光PCR檢測閾值設定原則:閾值線超過陰性對照擴增曲線的高點,且相交于陽性對照擴增曲線進入指數增長期的拐點,或根據儀器噪聲情況進行調整。每個樣品反應管內的熒光信號到達設定的域值時所經歷的循環數即為Ct值。
2、結果描述及判定
當陽性對照Ct值≤28.0且出現典型擴增曲線,陰性對照無Ct值無擴增曲線時,實驗成立,實例參考附錄E。當被檢樣品出現典型的擴增曲線且Ct值≤38.0時,判為非洲豬瘟病毒核酸陽性;被檢樣品無Ct值,判為非洲豬瘟病毒核酸陰性;對于Ct值>38.0的樣品且出現典型的擴增曲線,應重檢,重檢仍出現上述結果的判為陽性,否則判為陰性。
非洲豬瘟檢測屬于重大疫病檢測,要求儀器具有優異的性能,無論是強陽性樣品還是弱陽性樣品,都需要的篩查到。應對非洲豬瘟疫情,熒光定量PCR檢測必不可少。
非洲豬瘟檢測熒光定量pcr儀檢測結果的判定:
1、結果分析條件設定
實時熒光PCR檢測閾值設定原則:閾值線超過陰性對照擴增曲線的高點,且相交于陽性對照擴增曲線進入指數增長期的拐點,或根據儀器噪聲情況進行調整。每個樣品反應管內的熒光信號到達設定的域值時所經歷的循環數即為Ct值。
2、結果描述及判定
當陽性對照Ct值≤28.0且出現典型擴增曲線,陰性對照無Ct值無擴增曲線時,實驗成立,實例參考附錄E。當被檢樣品出現典型的擴增曲線且Ct值≤38.0時,判為非洲豬瘟病毒核酸陽性;被檢樣品無Ct值,判為非洲豬瘟病毒核酸陰性;對于Ct值>38.0的樣品且出現典型的擴增曲線,應重檢,重檢仍出現上述結果的判為陽性,否則判為陰性。