不同種類PCR各需要什么樣的梯度PCR儀?
發(fā)布時間:2014-02-25 閱讀:456次
如果想摸索PCR退火條件,當然是梯度PCR方便了,如果是想做定量,肯定是熒光定量pcr儀了。還有原位PCR儀,一般是在玻片上做的。至于重組PCR,降落PCR等,普通PCR儀就行了。
不同的梯度PCR儀不一樣的。一般別的的步驟和普通PCR都一樣,不同在于復性溫度的設置,多數(shù)是先設定一個復性溫度的范圍,然后是該范圍內的梯度數(shù),PCR儀會很據這兩個數(shù)據給出每個梯度數(shù)的具體溫度,然后你根據這些溫度選擇接近你所希望的復性溫度較接近的溫度所在的孔的位置,將ep管插入這些孔即可。
下面給詳細介紹PCR儀如何具體設置梯度pcr?
編寫程序:temp 設置溫度和時間ramp 調整變溫速率go to 設定循環(huán)的步驟Gradient 設置梯度溫度在Step 3 中選擇Gradient,下一個界面中Lower temp 輸入你所設梯度的下限溫度,Upper temp輸入你所設梯度的上限溫度。
再輸入時間注意:你輸入上限和下限溫度后,儀器會自動平分為8個梯度溫度。