基因擴增儀起著關鍵作用--全程實地監測
發布時間：2014-05-19 閱讀：336次
摘要：基因擴增儀熒光定量PCR技術是一次由定性技術向定量技術的飛躍，運用該項技術，可以對DNA、RNA樣品進行相對定量、定量和定性分析。它的關鍵性作用有什么，具體體現在哪些設計？
、基因擴增儀定義：
基因擴增儀對PCR產物進行標記跟蹤，實時監控反應過程。隨著PCR 反應的進行，反應產物不斷累積，熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環，收集一次熒光強度信號，這樣就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化，結合相應的軟件對產物進行分析，可以得到熒光擴增曲線，計算待測樣品初始模版的量。實時熒光定量PCR技術是一次由定性技術向定量技術的飛躍，運用該項技術，可以對DNA、RNA樣品進行相對定量、定量和定性分析。
第二、基因擴增儀起著關鍵的作用：
所謂real-time Q-PCR技術，是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號累積實時監測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在 real-time 技術的發展過程中，兩個重要的發現起著關鍵的作用：
1.它能降解特異性熒光記探針，因此使得間接的檢測PCR產物成為可能。
2.此后熒光雙標記探針的運用使在一密閉的反應管中能實時地監測反應全過程。
第三、它的具體體現有：
1.一機多用，無須換樣品座模塊，使用方便。
2.數量的基因擴增儀反應管、反應板實驗要求，大大節省了購買不同模塊備件的費用。
3.采用半導體Peltier熱循環控溫技術，控溫、速度快、節省實驗時間。
4.可調節式熱蓋防蒸發，加樣無油操作，簡單無污染，確保PCR擴增產物后處理的可靠。
5.具有溫度/時間，遞增/遞減等增強功能，可做降落（Touch down）PCR、長（Long）PCR、巢式PCR、NASBA、 環介導等溫擴增（LAMP）、連接酶鏈（LOR)、多態擴增分析等復雜操作。
6.樣品基座BLOCK和管內TUBE模擬兩種控溫模式可選；采用管內控溫模式時軟件根據用戶設定的擴增反應體積， 自動優化體積差異和動態穩定，實現佳擴增效果。
為改進提高本方法的自動化水平，有人設計了機械手裝置，替代上述手工移動標本過程，形成了機械手水浴式基因擴增儀，該改進解決了實驗人員的高強度勞動問題，但又帶來了一個機械手部件大行程頻繁相對運動而引起的高故障。
